L’atelier regroupe des moyens et compétences dans le domaine de la biologie cellulaire qu’il met à disposition de ses membres composés d’agents des unités Pegase et Numecan. Les moyens disponibles sont une salle de culture équipée d’incubateurs et de PSM spécifiques aux activités de culture primaire ou lignées, un cytomètre en flux, un appareil de comptage cellulaire et un microscope à contraste de phase.
Plusieurs modèles d’intérêt agronomique sont étudiés en lien avec les thématiques explorées en biologie animale : cellules provenant de tissus variés (tissu adipeux, sang, tissu musculaire, tissu mammaire, intestin, ganglions lymphatiques, rate) de différentes espèces (porc, vache, chèvre…) et lignées cellulaires (BME-UV1, MAC-T, CACO-2, C2C12…). Au sein de l’atelier, ont été développées des méthodologies pour isoler les cellules et les étudier par des technologies de cytométrie en flux, de tri cellulaire, des techniques de spectrophotométrie, d’immuno-marquage, etc. Plusieurs modes de culture sont également pratiquées : la culture sur divers supports (plastique, culture d’explants, utilisation de matrices extracellulaires type Matrigel, plastique hydrophobe type ULA).

Compétences

• Dissection et isolement cellulaire à partir de tissus, sang et lait.
• Analyses de prolifération et mort cellulaire.
• Cinétique de prolifération/différenciation.
• Cytométrie en flux.
• Tri cellulaire sur billes magnétiques.
• Culture sur lame type LabTek.
• Microscopie inversée à fluorescence.
• Transfection.
• Immortalisation cellulaire.
• Mesure de la perméabilité membranaire.

Équipements

Isolement cellulaire

• Dissociateur tissulaire automatique (GentleMACS, Miltenyi).
• Rotor Stator Mix (Miltenyi).

Tri cellulaire

• Support aimanté pour tri cellulaire à l’aide de billes magnétiques (MACS, Miltenyi).
• Colonnes MS/LS et billes magnétiques (Miltenyi).

Cytométrie en flux

• Cytomètre en flux MACSquant 10 (3 lasers/7 filtres).
• Passeur de tubes ou de plaque.
• Logiciels de traitement MACSquantify ou Flowlogic (Miltenyi).

Microscopie

• Microscope inversé à LED Axio vert A1 (Zeiss).

Culture cellulaire

• PSM.
• Hotte à flux laminaire.
• Incubateurs CO2.
• Centrifugeuses (SIGMA et EPPENDORF).
• Compteur de cellules ViCell et TC20 (Biorad).

Conditions d’accès

L'atelier répond aux demandes internes des équipes et des programmes scientifiques de l'UMR Pegase et de l'équipe EAT de l'institut Numecan, présente sur le même site.
Contact : Laurence Finot ou Perrine Poton